Pirolidonning pH qiymati va haroratining PVP suvli eritmasiga ta'siri hujayraning saqlanishida rol o'ynaydi. To'g'ri ishlash va to'g'ri muzlash sharoitlari hujayra xususiyatlarining o'zgarishi yoki yo'qolishini kamaytirishi mumkin. Aloqa qilinmagan PVP eritmasi maxsus tiksotropiyaga ega emas, agar kontsentratsiyasi yuqori bo'lmasa, u tiksotropiyaga ega bo'ladi va qisqa bo'shashish vaqtini ko'rsatadi. Hujayralarni muzlatish tajribasi: to'g'ri krio saqlov vositasini tanlash - shoh. Hujayra kryoprezervatsiyasi-bu hujayralar metabolizmini pasaytirish va uzoq muddatli saqlashga erishish uchun hujayralarni past haroratli muhitda saqlaydigan texnologiya. (Pirolidon) Ko'pchilik hujayra liniyalarida PVP ning qalinlashishi uning nisbiy molekulyar massasi bilan chambarchas bog'liq. Berilgan kontsentratsiyada nisbiy molekulyar massa qanchalik katta bo'lsa, uning yopishqoqligi shuncha yuqori bo'ladi. Hujayralar qarish va evolyutsiyada to'planib, o'zgarishda davom etadi, bu fenotip va genotipni (GG), madaniyatning siljishini&keltirib chiqaradi. To'g'ri va muvaffaqiyatli kryoprezervatsiya hujayralarni uzoq muddat qo'llashda muhim rol o'ynaydi.
Kriyoprezervatsiya jarayonida to'g'ri madaniyat va hujayralarni yumshoq yig'ish. Kriokonservatsiyadan oldin hujayralar yaxshi o'sish holatini saqlab turishi kerak (log yoki eksponensial fazada). Ideal holda, o'rim -yig'im yig'im -terimdan 24 soat oldin bo'lishi kerak. Hujayralarning ifloslanmaganligiga ishonch hosil qilish uchun madaniyatning, ayniqsa mikoplazmaning mikrob bilan ifloslanishini o'tkazish tavsiya etiladi. Hujayralarni yig'ish jarayonida eksperimental operatsiya hujayraning shikastlanishiga yo'l qo'ymaslik uchun iloji boricha yumshoq bo'lishi kerak. (Pirolidon) Tegishli krioprotektor. Hozirgi vaqtda xujayralarni kriopronervatsiyalashda suyuq azotli kriozervatsiya keng qo'llaniladi. Kerakli miqdordagi himoya vositasi bilan sekin muzlatish usuli asosan muzlash jarayonida hujayralarga zarar etkazish uchun hujayralarni muzlatish uchun ishlatiladi. Agar hujayralar himoya vositalarini qo'shmasdan to'g'ridan -to'g'ri muzlatilgan bo'lsa, hujayralar ichidagi va tashqarisidagi suv tezda muz kristallarini hosil qiladi, bu esa bir qator salbiy reaktsiyalarni keltirib chiqaradi.
Polivinilpirolidon, etilen glikol, metanol va metilatsetamid hammasi krioprotektor hisoblanadi. Odatda dimetil sulfoksid (DMSO) va glitserin hujayra krioprezervatsiyasida ishlatiladi. Bu ikkita modda kichik molekulyar og'irlikka, yuqori eruvchanlikka ega va hujayralarga oson kirib borishi mumkin. Ular muzlash nuqtasini pasaytirishi va hujayra membranalarining suv o'tkazuvchanligini yaxshilashi mumkin. Uyali aloqa uchun. (Pirolidon) DMSO odatda 5-10% (v/v) konsentratsiyaga ega va optimal konsentratsiyasi hujayra liniyalariga qarab o'zgaradi. Muzlatuvchi muhitda glitserinning oxirgi konsentratsiyasi 5-15%ni tashkil qiladi. Shunga qaramay, optimal konsentratsiya hujayra chizig'iga bog'liq. Saqlash qiyinroq bo'lgan hujayralarning omon qolish darajasini yaxshilash uchun siz kryoprezervatsiya paytida konserva eritmasidagi sarum kontsentratsiyasini oshirishni tanlashingiz mumkin. Agar siz hujayralarni tezroq va barqaror muzlatishni xohlasangiz, hujayrali kryoprezervatsiya suyuqligi yaxshi tanlovdir. Tayyorlashning hojati yo'q, faqat hujayralarga kerakli miqdordagi krio saqlovchini qo'shing. Amaliyot oddiy va siz yuqori hayotiy hujayralarga ega bo'lishingiz mumkin.